产品简介
琼脂糖作为凝胶电泳常用支持物,其纯度会直接影响 DNA 的分 辨能力及电泳结果的清晰度。Agarose 为高纯度的琼脂糖,通常配置 成浓度为 0.5 ~ 2% 的琼脂糖凝胶, 用于分离、鉴定核酸, 如 DNA 鉴定、 DNA 限制性内切核酸酶图谱制作等。加入核酸荧光染料,使用凝胶成 像扫描仪,即可观察电泳结束后的核酸条带。
质量控制
凝胶强度(1% 凝胶): > 1200 g/cm2;
电渗(EEO): < 0.15;
硫化物: ≤ 0.15%;
凝胶温度(1.5% 凝胶): 35~37℃;
熔胶温度(1.5% 凝胶): 87~89℃;
水分: ≤ 10%;核酸酶不得检出。
2. 琼脂糖凝胶制备(以水平电泳琼脂糖凝胶制备为例) :
① 根据制胶量及凝胶浓度,量取一 定量的电泳缓冲液(TAE 或 TBE),倒入三角锥形瓶中。
注:制胶缓冲液和电泳缓冲液需一致。
② 准确称量琼脂糖,小心加入上述三角锥形瓶中。在锥形瓶的瓶口盖 上牛皮纸,置于微波炉中加热溶解。加热至溶液沸腾后,请戴上防热 手套,小心晃动锥形瓶,如此重复数次,直至琼脂糖完全溶解。
注:琼脂糖溶解过程采用多次短暂沸腾的方法 , 避免溶液过热暴沸。保证琼脂糖 充分完全溶解,以免造成电泳图像模糊不清。
③ 在充分溶解的琼脂糖里加入核酸染料 。
④ 将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚 度一般在 3~5 mm 之间。
⑤ 室温下待胶凝固(大约 30 分钟 ~1 小时) ,置于电泳槽中进行电泳。
注意事项
1. 熔胶可能会引起暴沸,需注意防止烫伤。
2. 若使用具有致癌性的荧光染料进行凝胶核酸染色 ( 如溴化乙锭等 ), 请佩戴手套。
3. 配置好的凝胶如不立即使用,请将凝胶泡于电泳缓冲液(TAE 或者 TBE 中)备用,避免凝胶干胶。