Exosome（外泌体）鉴定跟分析

Exosome 鉴定

通常使用透射电镜检测（形态）、粒径检测（大小）、western blot检测等方法鉴定提取的外泌体。在进行WB检测时，通常检测外泌体标志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101等）。注：下图是深圳市尚唯生物科技有限公司Sunview外泌体提取试剂盒鉴定结果实例。

 Exosome 分析 

在下游分析方面，分离纯化出来的exosome可以做蛋白，也可以做RNA（microRNA和LncRNA），36%的研究人员通过Westernblot或其他方法来鉴定蛋白，29%的人员利用qPCR对microRNA表达谱进行分析，9%利用芯片进行microRNA表达谱分析。同时，新一代测序的用户也不少，13%的人员利用NGS开展microRNA/小RNA研究，9% 开展mRNA研究。此外，目前的大部分工作还是停留在科研阶段，后续的生物标志物开发和验证不多，而诊断和疗法的开发就更少。exosome的定性和定量研究是个快速发展的市场。同时，循环生物标志物的市场也存在着机遇和挑战。不过，无创产前检测技术的成功让人们相信，循环生物标志物有望在肿瘤及其他疾病的诊断上发挥作用。

1.蛋白分析（1）SDS-PAGE：通过SDS-PAGE电泳可以分析得到的Exosome中蛋白的含量及种类。（2）Western-Blot：通过Western-Blot可以检测Exosome中特定的蛋白表达情况。（3）2-DE等蛋白组学分析：可以了解Exosome中不同蛋白的表达、数量情况

2. 透射电镜通过透射电镜可以分析Exosome的大小、形态等，再结合免疫标记可以很清楚的分析特定指标在Exosome表达的部位。

3.基因水平（1）Real-Time PCR：通过PCR可以分析需要研究的指标的表达量（2）转录组分析：通过测序或者芯片，分析Exosome不同基因的转录水平（3）miRNA ：通过测序或者芯片，检测与Exosome相关的miRNA的表达情况，研究特定的miRNA（4）lncRNA分析：通过测序或者芯片，检测与Exosome相关的lncRNA的表达情况，研究特定的lncRNA与Exosome共同调控某种疾病的关系